La Ley de Beer-Lambert relaciona la atenuación de la luz con las propiedades del material a través del cual viaja la luz.
Fórmula: A = εcl
Donde:
- A = Absorbancia (sin unidades)
- ε = Absortividad molar (L·mol⁻¹·cm⁻¹)
- c = Concentración (mol/L)
- l = Longitud de camino (cm)
| Muestra | Valor de Entrada | Resultado |
|---|
La Ley de Beer-Lambert (también llamada Ley de Beer) es una relación entre la atenuación de la luz a través de una sustancia y las propiedades de esa sustancia. Establece que la absorbancia (A) de la luz por una solución es directamente proporcional a la concentración (c) de la solución y la longitud de camino (l) de la luz a través de la solución.
La ley se expresa matemáticamente como:
A = εcl
Donde:
- A es la absorbancia (sin unidades)
- ε es la absortividad molar (L·mol⁻¹·cm⁻¹)
- c es la concentración de la especie absorbente (mol/L)
- l es la longitud de camino a través de la muestra (cm)
- Selecciona lo que quieres calcular del menú desplegable "Calcular" en la barra lateral.
- Ingresa los valores conocidos en los campos de entrada que aparecen.
- Elige unidades apropiadas para la longitud de camino y concentración si es necesario.
- Haz clic en "Calcular" para ver el resultado y los pasos detallados del cálculo.
- Usa el gráfico para visualizar la relación entre concentración y absorbancia.
- Para múltiples muestras, usa la pestaña Calculadora por Lotes.
La absorbancia (A) es una cantidad adimensional que mide cuánta luz es absorbida por una muestra. Se define como:
A = log₁₀(I₀/I)
Donde:
- I₀ es la intensidad de la luz incidente
- I es la intensidad de la luz transmitida
Puntos clave sobre la absorbancia:
- La absorbancia no tiene unidades
- Los valores típicos oscilan entre 0 y 2 para mediciones precisas
- Valores por encima de 2 significan que muy poca luz llega al detector
- La absorbancia depende de la longitud de onda
La Ley de Beer-Lambert es ampliamente utilizada en química y bioquímica para:
- Determinación de concentración: Medir concentraciones desconocidas de soluciones
- Cinética química: Monitorear el progreso de reacciones en el tiempo
- Control de calidad: Garantizar consistencia en procesos de manufactura
- Monitoreo ambiental: Medir contaminantes en agua
- Diagnósticos clínicos: Analizar sangre y otras muestras biológicas
Compuestos comunes analizados usando esta ley incluyen:
- Permanganato de potasio (KMnO₄) - púrpura, λ_max ≈ 525-545 nm
- Sulfato de cobre (CuSO₄) - azul, λ_max ≈ 600-800 nm
- Proteínas (usando ensayos Bradford o BCA)
- ADN/ARN (absorbancia a 260 nm)
Aunque la Ley de Beer-Lambert es ampliamente aplicable, tiene varias limitaciones:
- Concentración: La ley falla a altas concentraciones (>0.01M) debido a interacciones moleculares
- Cambios químicos: La especie absorbente no debe sufrir cambios químicos (asociación, disociación o reacción) con la concentración
- Luz monocromática: La ley asume luz perfectamente monocromática, que nunca se logra perfectamente
- Dispersión: La muestra no debe dispersar luz (debe ser clara, no turbia)
- Fluorescencia: La muestra no debe fluorescer significativamente a la longitud de onda de medición
- Luz parásita: El instrumento debe tener mínima luz parásita llegando al detector
Para resultados precisos, las mediciones de absorbancia deberían estar típicamente en el rango de 0.1 a 1.0.